酶聯(lián)免疫測定( ELISA )，也稱為酶免疫測定，是定量生物分子（如肽、蛋白質(zhì)、抗體和激素）的黃金標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。ELISA檢測有兩種類型：直接ELISA和間接ELISA。直接和間接ELISA之間的主要區(qū)別在于間接ELISA更敏感并且需要添加二抗，而直接ELISA敏感度較低并且僅使用一抗。

  什么是直接ELISA?

  ELISA可以應(yīng)用疾病診斷測定，用于識(shí)別血液中是否存在特定抗原或抗體。在微孔板上進(jìn)行的ELISA實(shí)驗(yàn)操作。它使用與易于測定的酶連接的抗體。血清樣本中的抗原與與酶連接的特定抗體結(jié)合。在最后一步中，添加特定底物與酶發(fā)生反應(yīng)。酶將底物轉(zhuǎn)化為有色或產(chǎn)生信號(hào)的產(chǎn)物。化學(xué)底物的顏色變化揭示了血清樣本中特定抗體的存在。直接ELISA測試僅使用與酶連接的一抗。與抗原結(jié)合后，它會(huì)迅速改變顏色，表明血液中存在傳染性病原體。但是，由于表位僅限于抗原結(jié)合，因此直接ELISA中的信號(hào)強(qiáng)度較弱。因此，與間接ELISA相比，直接ELISA的靈敏度較低。

  什么是間接ELISA？

  ELISA可以使用兩種類型的抗體進(jìn)行，即：一抗和二抗。間接ELISA 使用兩種類型的抗體來放大信號(hào)以便更好地檢測。抗原通過孵育被動(dòng)附著到孔上，洗滌后，將抗原特異性抗體（一抗）與抗原一起孵育。清洗孔并通過添加與酶共價(jià)連接的抗物種抗體（二抗）來檢測結(jié)合的抗體。二抗對于產(chǎn)生所添加的第一抗體的物種具有特異性。間接ELISA比直接ELISA更靈敏。然而，由于二抗的交叉反應(yīng)，間接ELISA可能會(huì)產(chǎn)生非特異性信號(hào)。

  直接ELISA與間接ELISA區(qū)別

直接ELISA與間接ELISA區(qū)別
與間接 ELISA 相比，直接 ELISA 的靈敏度較低。		間接 ELISA 靈敏度更高。
花費(fèi)時(shí)間
直接 ELISA 測試是一個(gè)快速的過程。		間接 ELISA 比較耗時(shí)。
抗體使用
直接 ELISA 僅使用一種抗體（一抗）。		間接 ELISA 需使用一抗和二抗。
與酶的聯(lián)系
一抗與酶相連。		二抗與酶相連。
第二抗體的交叉反應(yīng)
直接 ELISA 消除了二抗的交叉反應(yīng)。			間接 ELISA 會(huì)受到二抗交叉反應(yīng)的影響。
信號(hào)
與間接 ELISA 相比，信號(hào)較弱。	間接ELISA法中信號(hào)被放大，因此很容易檢測。

  ELISA是一種生化技術(shù)，主要用于免疫學(xué)，可以用來檢測生物分子（如肽、蛋白質(zhì)、抗體和激素）。它可以通過兩種過程進(jìn)行，即直接或間接ELISA。直接ELISA測試僅使用一抗來檢測抗原，而間接ELISA同時(shí)使用一抗和二抗。在直接ELISA中，一抗被標(biāo)記，而在間接ELISA中，二抗被標(biāo)記。這就是直接ELISA和間接ELISA之間的區(qū)別。