在生物實驗中,試劑盒的使用扮演著舉足輕重的角色。其中,Elise試劑盒以其卓越的性能和廣泛的應用范圍,受到了廣大科研工作者的歡迎。要充分發揮Elise試劑盒的優勢,需要掌握正確的使用方法。本文上海通蔚生物將為你揭示如何使用Elise試劑盒,幫助你成為實驗達人。
了解試劑盒的組成和原理
在使用Elise試劑盒之前,首先需要了解試劑盒的組成和原理。Elise試劑盒主要包括反應液、終止液和洗滌液。反應液中含有特異性識別目標分子的抗體,終止液用于終止反應,洗滌液則用于去除未結合的物質。了解這些組成部分及其作用原理,有助于正確使用試劑盒。
Elise試劑盒使用方法詳解
在實驗前,請將試劑盒、樣本取出;室溫放置半小時,恢復至室溫。
第一步:ELISA緩沖液配制
吸取5毫升10x Assay Buffer緩沖液,至50ml離心管,吸取50ml20x洗液至1升量筒,加蒸餾水至1000毫升。
第二步:標準品溶解和稀釋
取出標準品,2000rpm離心2分鐘,以便管壁上的粉末集中到管底,根據標簽,加入一定的蒸餾水,蓋上蓋子,渦旋震蕩5秒,靜置10-30分鐘至粉末完全溶解,準備8個1.5毫升的EP管,標注S1至S7和空白,用于標準品對策梯度稀釋;
加入150微升標準品稀釋液,吸取150微升重溶的標準品,至S1中進行2倍稀釋,吹打10次混勻,渦旋震蕩5秒,從S1管中吸取150微升液體,至S2管中,吹打混勻,繼續以上步驟梯度稀釋至S2至S7;
第三步:稀釋檢測抗體
檢測抗體為100x濃縮液,所以吸取50微升檢測抗體,至5毫升1x Assay Buffer震蕩混勻備用;
第四步:加樣
取出已恢復至室溫的酶標板,加入300微升洗液,以洗去包被抗體保護劑,使包被抗體處于較好的活性狀態,靜置浸泡30秒。洗板結束后,立即使用酶標板,不要讓酶標板干燥。
elise試劑盒使用注意事項包括:
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嚴格按照實驗室操作規范進行人員防護和消毒。
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試劑儲存要按照規定的溫度和條件進行。
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樣本處理時要保持穩定,任何樣本在操作之前都應該穩定,這樣才能得到更可靠的結果。
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加樣時要將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出。
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保溫時要注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確,保證各板的溫度都能迅速平衡。
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任何可能引起污染的因素都需要避免,包括交叉污染,潔凈實驗環境。
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在完成Elise試劑盒操作后,需要對結果進行分析和解釋。如果發現異常結果,應仔細檢查操作步驟是否正確或者重新做實驗。
上述為大家介紹Elise試劑盒使用方法及步驟,在Elise試劑盒使用過程除了上述方法之外,要遵守使用事項,避免操作過程出現問題。