發布時間:2024-04-16 發布作者:通蔚生物
PCR和qPCR有什么區別?PCR可以實現DNA片斷擴增,而qPCR具有實時定量擴增的 DNA 片段,這就意味著qPCR 不僅可以告訴你某個 DNA 片段是否存在,還可以告訴你它的數量有多少。如果您還不了解,沒關系,接下來上海通蔚將這些分子生物學概念更加巨像化,便于您的理解。
PCR(聚合酶鏈式反應)是一種實驗室技術,由KaryMullis在20世紀80年代開發,如今用于從少量DNA產生大量DNA。
PCR通常是其他過程中使用的步驟,例如DNA測序、病原體檢測和凝膠電泳。PCR是一種重要的診斷技術,常用于病毒學、微生物學、寄生蟲學、真菌學和牙科等領域。
聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于制備DNA特定片段的多個副本的方法。這個過程從少量模板DNA開始,然后通過稱為聚合酶的酶進行復制。通過重復加熱和冷卻循環可以增加復制的數量,這會分離DNA鏈,以便它們可以再次復制。
PCR的最終產物是目標DNA序列的大量相同副本。然后該產品可用于進一步分析,例如測序或Southern印跡。PCR還可用于從mRNA模板分子制備cDNA。
定量聚合酶鏈式反應(qPCR或定量PCR)與PCR非常相似,但它還允許您量化樣品中存在的目標DNA的量。qPCR涉及在擴增過程中添加與目標DNA結合的熒光染料或探針。當這些探針被激光激發時,它們會發出不同波長的光。
通過測量每個波長發出的光,您可以確定在擴增開始之前樣品中存在多少目標DNA。qPCR還可用于通過測量熒光隨時間的增加來實時監測擴增進度。
PCR和qPCR之間的主要區別在于qPCR是實時方法,而PCR不是。這意味著通過qPCR,您可以實時監控目標DNA的擴增情況。
兩種方法之間的另一個區別是qPCR需要使用熒光染料或探針,而PCR則不需要。這些探針可讓您定量樣品中存在的目標DNA的量。
PCR通常用于擴增DNA以進行測序或其他下游應用。
qPCR通常用于檢測和定量RNA病毒。
聚合酶鏈式反應
PCR是一個相對簡單的過程,可以檢測DNA是否存在。PCR應用于許多不同的領域,包括法醫學、醫學和生物技術。它經常用于擴增小片段DNA以進行測序或其他下游應用。
PCR還可用于從mRNA模板分子制備cDNA。
定量PCR
qPCR提供測量反應速率的實時數據,提供有關任何給定時間樣本中存在的DNA數量的信息,本質上,它能夠測量基因表達速率。
在分子生物學中,這有助于理解蛋白質合成,從而有助于理解健康和疾病的生物途徑。實時或qPCR可用于檢測基因表達、病原體和RNA的存在和數量,以及驗證DNA微陣列結果和環境應用。
qPCR具有高通量和更寬的動態范圍的優點,因為它可以在同一孔內檢測廣泛的表達水平。由于其多重功能,可以在同一實驗中擴增多個目標、高通量和快速結果,因此運行起來更加經濟。
有許多不同類型的設備可用于PCR和qPCR。最常見的設備類型是熱循環儀,它用于加熱和冷卻樣品以使DNA擴增發生。
其他常見類型的設備包括逆轉錄酶、熒光染料或探針以及激光器。根據您的具體應用,您可能還需要其他類型的設備。
PCR和qPCR是許多不同領域中使用的重要方法。通過了解它們之間的主要區別,您可以為您的特定應用選擇合適的方法。
PCR和qPCR區別通蔚給大家介紹到這里。其實PCR和qPCR區別就在于qPCR 通過使用熒光染料或探針來實現實時監測和定量。簡單來說,qPCR 在 PCR 的基礎上增加了一個“計數器”,可以更精確地測量 DNA 擴增的數量。其實它們之間擴增原理和實驗流程差別不大。也希望您通過學習和了解,在今后的PCR實驗中增加更多樂趣和成果。