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021-54845833/15800441009
細胞信息
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細胞名稱 |
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細胞品牌 |
通蔚生物 |
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種屬來源 |
人 |
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組織來源 |
乳腺癌 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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細胞形態 |
不規則細胞 |
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細胞簡介 |
乳腺癌是一種嚴重影響女性健康甚至危及生命的惡性腫瘤之一，其發生發展不僅是腫瘤細胞本身的作用，而且與腫瘤微環境密切相關。乳腺癌作為女性最常見的惡性腫瘤之一，是發生在乳腺上皮組織的惡性腫瘤。發病常與遺傳相關。乳腺癌細胞具有高度的異型性，細胞形態及大小不等。乳腺癌干細胞 是一群未分化、具有自我更新、一定多系分化潛能的細胞，是第一個在實體瘤中被鑒定的腫瘤干細胞。乳腺癌干細胞起源的假說有以下兩種，一種是乳腺癌干細胞起源于成體干細胞，通過遺傳改變獲得惡性行為，另一種是乳腺癌干細胞由早期祖細胞獲得了自我更新能力轉化而來。 |
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質量檢測 |
不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等 |
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細胞規格 |
5x10?cells/T25或1mL凍存管 |
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培養基 |
人乳腺癌腫瘤干細胞專用培養基 |
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培養條件 |
氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
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換液頻率 |
每2-3天換液一次 |
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消化液 |
0.25%胰蛋白酶 |
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細胞貨期 |
現貨 ，1周左右 |
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發貨方式 |
復蘇發貨（免運輸費用）/ 凍存發貨（需加干冰運輸費用） |
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供應范圍 |
僅限于科研實驗使用，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 |
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特別說明 |
具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
細胞培養操作
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收貨處理 |
取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態 |
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傳代密度 |
細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養 |
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復蘇步驟 |
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL完全培養基，培養過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。 |
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傳代步驟 |
a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 -3min（視細胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml完全培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。 c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。 |
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細胞凍存 |
a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。 b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
注意事項
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重要提醒 |
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。 2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。 3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。 4. 運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。 |
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到貨須知 |
1. 收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，干冰運輸的細胞檢查干冰是否完全揮發，細胞是否解凍，若有上述現象發生請及時和我們聯系。 2. 靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照（當天以及第 2,3 天請拍照），記錄細胞狀態 (所拍照片將作為后續服務依據)；建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長狀態。 3. 由于運輸的原因，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現象。個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。 4. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。 |
售后服務
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細胞予重發 |
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1. 細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等，重發。 |
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2. 收到細胞未開封，如出現污染狀況，重發。 |
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3. 收到細胞3天內，發現污染問題，經核實后，重發。 |
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4. 常溫發貨細胞靜置2小時后，干冰凍存發貨細胞復蘇2天后，絕大多數細胞未存活，經核實后，重發。 |
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5. 常溫發貨的細胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后，出現污染經核實后，重發。 |
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6. 細胞活性問題在收到產品3天內提出真實實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經核實后，重發。 |
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細胞不予重發 |
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1. 客戶操作造成細胞污染，不重發。 |
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2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好，不重發。 |
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3. 非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發。 |
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4. 細胞狀態不好，未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片，不重發。 |
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5. 細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的，不重發。 |
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6. 收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發。 |
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特別說明 |
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上海通蔚生物客戶在細胞培養過程中，有任何技術問題可以撥打免費服務電話021-54845833或15800441009，我們隨時給予實驗中的免費解答。 |
