測定規(guī)格:48樣
有 效 期:6個月
測定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
產(chǎn)品簡介:
普魯蘭酶是一種水解酶,廣泛存在于微生物及動物、植物體內(nèi),能專一地分解淀粉和糖原及其衍生物分枝點的α-1.6-葡萄糖昔鍵。它的這種特性最早被用于淀粉結(jié)構(gòu)的理論研究,到七十年代,普魯蘭酶的應(yīng)用已擴(kuò)展到淀粉糖漿、啤酒和酒精生產(chǎn)等多個淀粉深加工領(lǐng)域,并逐步從實驗室階段走向工業(yè)化規(guī)模。普魯蘭酶催化普魯蘭分解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與 3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,經(jīng)光譜掃描在 540nm 有特征光吸收,在一定范圍內(nèi) 540nm 光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算普魯蘭酶活性大小。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
普魯蘭酶活性測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗樣本和試劑浪費!
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程:
1. 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液(5mg/mL):向標(biāo)準(zhǔn)品 EP 管里面加入 1mL 蒸餾水(母液需在兩天內(nèi)用且-20℃保存)。
2. 把母液稀釋成六個濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0, 1, 2, 3, 4, 5. mg/mL。也可根據(jù)實際樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
3. 按照:20μL 標(biāo)準(zhǔn)品+100μL 蒸餾水+100μL 試劑三,95℃水浴 10min,冷卻后,再加500μL 蒸餾水,混勻,全部液體轉(zhuǎn)移至 1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)中,540nm 下測定,根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。