基本信息
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
中文名稱 :倉鼠腎成纖維細胞
細胞簡稱 :BHK-21 [C-13]
細胞別稱 :BHK 21; BHK21; Baby Hamster Kidney-21; Baby Hamster Kidney 21; BabyHamster Kidney from litter No. 21; BHK
細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
生長特性 :貼壁細胞P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 :空氣,95%;CO2,5%37℃
凍存條件 :55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO液氮
完全培養(yǎng)基 : MEM(含NEAA)(PM150410)+10% FBS(164210-50)+1%
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液。
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
8、消化時間 1~2分鐘
傳代比例(密度) : 1:3-1:4
換液頻次 : 2~3次/周
細胞背景描述
細胞背景描述 : BHK-21 [C-13]的親本細胞株是由I·A·Macpherson和M·G·P·Stoker于1961年3月從1日齡的倉鼠建立的。隨后84天連續(xù)培養(yǎng),僅中斷8天進行凍存,通過單細胞分離建立了13號克隆,即BHK-21 [C-13]。BHK-21 [C-13]細胞可用作轉(zhuǎn)染宿主,用于表達包含選擇及擴增標記的DNA的載體。
倍增時間 : ~12 hours
供體年齡 : 1日齡
組織來源 : 正常腎
細胞類型 : 自發(fā)永生化細胞
生物安全等級 :1
收到常溫細胞后如何處理
細胞培養(yǎng)詳細操作步驟請參照通蔚生物細胞培養(yǎng)操作指南
1.收到常溫細胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2.用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4.靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5.若觀察到異常或者對細胞有疑問,請及時跟我們聯(lián)系。對于細胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)。可跟我們的技術(shù)支持交流。