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293T/17人胚腎細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
中文名稱 ：人胚腎細(xì)胞
細(xì)胞簡稱 ：293T /17
細(xì)胞別稱 ：HEK 293T /17;293T /17
細(xì)胞形態(tài) ：上皮細(xì)胞樣
生長特性 ：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 ：空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 ：DM EM (PM 150210)＋10% F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 ：0.5~ 1分鐘
換液頻次 ：2~ 3次/周
傳代比例（密度） ：1:3-1:4
收貨注意事項(xiàng)
若收到細(xì)胞大片脫落，請(qǐng)按照如下處理方式處理
1、將培養(yǎng)瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基 轉(zhuǎn)入無菌離心管，離心收集細(xì)胞（1200rpm 3min）去除舊培養(yǎng)基。
2、用 PBS 重懸細(xì)胞，將所有細(xì)胞收集到一個(gè)離心管中，再次離心（1200rp m 3min）去除PBS。
3、加入1ml左右0.25% 胰酶重懸細(xì)胞，混勻即可，不能吹打太多次，放入培養(yǎng)箱消化3分鐘。
4、消化好后，用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液，使細(xì)胞團(tuán)分散，迅速加入3-5ml含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化，離心（1200rpm3min）去除胰酶。
5、加入5ml左右的細(xì)胞相應(yīng)的完全培養(yǎng)基混勻，按比例接入無菌培養(yǎng)瓶/皿中（首次傳代推薦1:3）。
細(xì)胞背景描述
293T /17細(xì)胞株是293T 細(xì)胞株的衍生株，293T 是293 [H EK -293]細(xì)胞株插入了SV 40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。293T細(xì)胞進(jìn)行克隆，檢測pBN D 和pZ A P載體，得到一株能生成高滴度感染逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生株293T /17細(xì)胞。293T /17細(xì)胞持續(xù)表達(dá)猿病毒40(SV 40)大T 抗原，而因其高轉(zhuǎn)染能力篩選到17號(hào)克隆。293T /17細(xì)胞用pC RIPenv-和pC RIPgag-2載體轉(zhuǎn)染得到A N JO U 65細(xì)胞株，A N JO U 65細(xì)胞再用pC R IPgag-2和pG PT 2E載體轉(zhuǎn)染得到親宅性外殼表達(dá)細(xì)胞株BO SC 23。A N JO U 65細(xì)胞用攜帶gpt抗性基因的pC RIPA M gag載體轉(zhuǎn)染得到Bing雙向性表達(dá)包裝細(xì)胞株。
供體年齡 ：胚胎
組織來源 ：腎
細(xì)胞類型 ：轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生物安全等級(jí) ：2
細(xì)胞保藏中心 ：ATCC ; C R L-11268
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異?；蛘邔?duì)細(xì)胞有疑問，請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系；對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)?？筛覀兊募夹g(shù)支持交流。
售前須知
該細(xì)胞貼壁松散，操作時(shí)請(qǐng)盡量輕柔；換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基；收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán)，為正常現(xiàn)象，請(qǐng)按照收貨注意事項(xiàng)處理。
