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021-54845833/15800441009
產品簡介
產品名稱 ： 大鼠脾臟單核細胞
產品品牌 ： 通蔚生物
組織來源 ： 脾臟
產品規格 ： 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
大鼠脾臟單核細胞分離自脾臟組織；脾臟是機體最大的免疫器官，占全身淋巴組織總量的25% ，含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞，是機體細胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區后外方肋弓深處，與9－11肋相對，長軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰，前方有胃，后方與左腎、左腎上腺毗鄰，下端與結腸脾溝相鄰，地柔軟的網狀內皮細胞器官。單核細胞（m onocytes）是體積最大的白細胞。其細胞核常偏位，呈多形性，如卵圓形、腎形(a)、馬蹄形(b)、不規則形（c）等，常有折疊感(c)；染色質呈疏松網狀，著色較淺。胞質較多，嗜堿性，但因含大量細小的嗜天青顆粒而染成灰藍色，顆粒含過氧化物酶。單核細胞是血液中最大的血細胞。
目前認為它是巨噬細胞的前身，具有明顯的變形運動，能吞噬、清除受傷、衰老的細胞及其碎片。單核細胞還參與免疫反應，在吞噬抗原后將所攜帶的抗原決定簇轉交給淋巴細胞，誘導淋巴細胞的特異性免性反應。單核細胞也是對付細胞內致病細菌和寄生蟲的主要細胞防衛系統，還具有識別和殺傷腫瘤細胞的能力。淋巴細胞則為具有特異性免疫功能的細胞。T淋巴細胞主要參與細胞免疫反應而B淋巴細胞參與體液免疫反應。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠脾臟單核細胞采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠脾臟單核細胞經C D 14免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ： 含FBS、M -C SF、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次 生長特性 半貼壁半懸浮 細胞形態 巨噬細胞樣
傳代特性 ： 不傳代，不增殖，存活1-2周
傳代比例 ： 不傳代
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 ： 氣相：空氣，95% ；C O2，5%
大鼠脾臟單核細胞體外培養周期有限；建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
大鼠脾臟單核細胞是一種半貼壁半懸浮細胞，細胞形態呈巨噬細胞樣，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞不傳代，不增殖，存活1-2周；建議您收到細胞后盡快進行相關驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2.半貼壁半懸浮細胞處理
1）收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中，用吸管吸取PBS，吹洗細胞培養瓶1-2次，收集清洗液；經1200-1500rpm 離心3min，棄上清，收集細胞沉淀①。
2）添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3）用吸管輕輕吹打混勻，收集細胞懸液至離心管中；經1200-1500rpm 離心3min，棄上清，收集細胞沉淀②。
4）吸取5ml新鮮完全培養基，重懸細胞沉淀①、細胞沉淀②,把①、②混勻。
5）用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞，按實驗需求接種于實驗器皿內，然后補充適量新鮮
的完全培養基，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
6）待細胞狀態穩定后，用于實驗；可以每2-3天換液一次新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1m g/ml），明膠（0.1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
