產品簡介
產品名稱 :小鼠骨細胞
產品品牌 :通蔚生物
組織來源 :骨組織
產品規格 :5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
小鼠骨細胞分離自骨組織。骨組織的細胞成分包括骨原細胞、成骨細胞、骨細胞和破骨細胞。只有骨細胞存在于骨組織內,其他三種細胞均位于骨組織的邊緣。骨細胞(O steocyte) 是人體骨骼中最主要的細胞成分。在成年人骨骼中,骨細胞占細胞總數量的90% ~95%,大約是成骨細胞數量的20倍。骨細胞生長在骨骼內部的骨基質中。
骨細胞的細胞體呈梭形或類圓形,位于基質構成的骨陷窩內。與神經細胞類似,每個骨細胞具有大量向外延伸的突觸,而這些突觸均位于由骨基質構成的骨小管結構中。通過這些突觸,骨細胞能夠與骨表面的細胞、周圍其它的骨細胞進行“交流”。普遍認為,骨細胞起源于成骨細胞。在骨形成的終末階段,成骨細胞將可能有3種不同的歸宿:分化成為骨細胞、轉移至骨表面成為暫不活動的成骨細胞、進入程序死亡過程(凋亡) 。
骨細胞為扁橢圓形多突起的細胞,核亦扁圓、染色深。胞質弱嗜堿性。電鏡下,胞質內有少量溶酶體、線粒體和粗面內質網,高爾基復合體亦不發達。骨細胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內。相鄰骨細胞的突起之間有縫隙連接。
在骨基質中,骨細胞胞體所占據的橢圓形小腔,稱為骨陷窩,其突起所在的空間稱骨小管。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連。骨陷窩和骨小管內均含有組織液,骨細胞從中獲得養分。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的小鼠骨細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10 5cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的小鼠骨細胞經骨鈣素免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :梭形、多角形
傳代特性 :屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群
傳代比例 :不傳代
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%
小鼠骨細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
小鼠骨細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈梭形、多角形,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入3-5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,調整合適密度按實驗需求接種對應實驗器皿,然后按器皿大小補充適當新鮮的完全培養基,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察,用于實驗。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。