購(gòu)物車(chē)
幫助
021-54845833/15800441009
大鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品名稱 ： 大鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 ： 通蔚生物
組織來(lái)源 ： 脊髓組織
產(chǎn)品規(guī)格 ： 5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介
大鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞分離自脊髓組織；脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu)，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù)；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來(lái)處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對(duì)的神經(jīng)，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個(gè)H 形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū)，主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成；在灰質(zhì)區(qū)周?chē)鸀榘踪|(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡(jiǎn)單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對(duì)的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。
脊髓是周?chē)窠?jīng)與腦之間的通路，也是許多簡(jiǎn)單反射活動(dòng)的低級(jí)中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié)，31對(duì)脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)干細(xì)胞是一類(lèi)具有分裂潛能和自更新能力的母細(xì)胞，它可以通過(guò)不對(duì)等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類(lèi)細(xì)胞。需要強(qiáng)調(diào)的是，在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中，不同的神經(jīng)干細(xì)胞類(lèi)型產(chǎn)生的子代細(xì)胞種類(lèi)不同，分布也不同。神經(jīng)干細(xì)胞作為干細(xì)胞的一種，它具有其它所有干細(xì)胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統(tǒng)大部分類(lèi)型細(xì)胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間甚至終生，對(duì)損傷和疾病具有反應(yīng)能力。
神經(jīng)干細(xì)胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移，并向神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力，已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點(diǎn)，體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提。神經(jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成神經(jīng)球，神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長(zhǎng)。
方法簡(jiǎn)介
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞采用胰蛋白酶消化后差速貼壁，結(jié)合神經(jīng)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，總量約為5×105cells/瓶 。
質(zhì)量檢測(cè)
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞經(jīng)N estin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ： 含B-27 Supplem ent、EG F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 ： 懸浮
細(xì)胞形態(tài) ： 球形
傳代特性 ： 可傳2-3代
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶，A ccutase
培養(yǎng)條件 ： 氣相：空氣，95% ；C O2，5%
大鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用通蔚生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
使用方法
大鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈球形，在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1.取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.懸浮細(xì)胞處理
1) 收集T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中，用PBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶1-2次，收集清洗液。
2) 1200rpm 離心3min，棄上清，收集細(xì)胞沉淀。
3-1) 添 加 0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中，用吸管輕輕吹打混勻，37℃溫浴2-3min；消化結(jié)束后，加入胰酶抑制劑(避免使用血清)終止消化，用吸管輕輕吹打，分散神經(jīng)干細(xì)胞球。
3-2) 建議使用A ccutaseT M 消化液，添加消化液1m L至離心管中，用吸管輕輕吹打混勻，37℃溫浴5-8min；消化結(jié)束后，無(wú)需終止，用吸管輕輕吹打，分散神經(jīng)干細(xì)胞球。
3-3) 若神經(jīng)干細(xì)胞球較小，可加入2ml完全培養(yǎng)基，直接用吸管輕輕吹打，分散神經(jīng)干細(xì)胞球。
4)1200rpm 離心5min，棄上清，收集細(xì)胞沉淀；加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻；按傳代比例進(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
5) 待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后，培養(yǎng)觀察；之后按換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。
