產品簡介
產品名稱 :大鼠腸道干細胞
產品品牌 :通蔚生物
組織來源 :腸組織
產品規格 :5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
大鼠腸道干細胞分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至肛門的消化管。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經肛門排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內最大的微生態系統。
腸道干細胞(ISC )也稱腸道上皮干細胞,主要位于腸黏膜隱窩內,其與腸道黏膜上皮的更新和修復密切相關。正常情況下,位于隱窩基底部的腸道干細胞不斷向隱窩頂部(腸腔方向)遷移,整個遷移過程大約3-5d,在遷移過程中腸道干細胞分化形成不同的腸黏膜細胞。當受到外界生理或病理信號作用時,ISC 可持續增殖、分化為成熟腸上皮細胞,如腸型細胞、杯狀細胞、內分泌細胞和潘氏細胞等,從而維持腸道黏膜結構和功能的穩定性。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠腸道干細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化后,用腸道干細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠腸道干細胞經M SI-1免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :懸浮 細胞形態 球形 傳代特性 可傳3代左右
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0.25% 胰蛋白酶
培養條件 :氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠腸道干細胞體外培養周期有限;建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
大鼠腸道干細胞是一種懸浮細胞,細胞形態呈球形,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳3代左右;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2.懸浮細胞處理
1) 收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中,用PBS清洗細胞培養瓶1-2次,收集清洗液。
2)1200-1500rpm 離心3min,棄上清,收集細胞沉淀。
3) 加入5ml新鮮完全培養基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞;將分散好的細胞調整合密度接種至培養器皿中,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 若遇到懸浮細胞團塊較大,無法機械吹散時,向步驟2)中細胞沉淀添加0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min,消化結束后,加入胰酶抑制劑(或血清)終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細胞;1200rpm 離心5min,棄上清,收集細胞沉淀。
5) 加入5ml新鮮完全培養基,用吸管輕輕吹打混勻;按傳代比例進行接種傳代,然后補充
新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
6) 待細胞狀態穩定后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。