產品簡介
產品名稱 :大鼠肝枯否細胞
產品品牌 :通蔚生物
組織來源 :肝臟組織
產品規格 :5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
大鼠枯否細胞分離自肝臟組織。肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用。肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。
肝臟在機體位置和形態結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。枯否氏細胞(K upffer細胞) 是肝臟的肝血竇內一些固定于竇壁的巨噬細胞,它能吞噬和清除大部分從腸道來的抗原微粒,并能吞噬和清除肝血竇中的細菌、異物和衰老的紅細胞,并把血紅蛋白分解成膽紅素。此外,肝巨噬細胞也有處理抗原,誘導T細胞增殖,參與免疫調節的作用。
枯否氏細胞和一般巨噬細胞不同,枯否氏細胞不具有增加抗原免疫原性的能力,相反有消除或減弱抗原性的作用。枯否氏細胞能吞噬來自血液循環的抗原抗體復合物和其他有害物質,以消除這些物質對機體的損害。枯否細胞功能障礙可導致腸源性內毒素血癥。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠肝枯否細胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠肝枯否細胞經C D 68免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :梭形、巨噬細胞
傳代特性 :屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群
傳代比例 :不傳代
消 化 液 :利多卡因(12m M )
培養條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
大鼠肝枯否細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
大鼠肝枯否細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈梭形、巨噬細胞,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 特殊細胞消化一
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加利多卡因(12m M ) 消化液1m L至培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,37℃溫浴3min(不能超過5min) 。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5m l完全培養基稀釋消化液。
3) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞,吸出細胞懸液,經1200rpm 離心5min,丟棄上清。
4) 用完全培養基重懸細胞,計數接種于相應實驗器具內,待細胞完全貼壁后開始試驗(預計2h 貼壁,12-24h 完全展開) 。
5) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 特殊細胞消化二
1) 若細胞無法消化,更換消化液為0. 25% 胰蛋白酶,按照上述消化一方案操作。
2) 若仍然無法消化,加入3ml完全培養基終止消化,采用無菌細胞刮,直接刮取細胞(此法不推薦,最后選擇,會造成細胞機械損傷死亡) 。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。