產品簡介
產品名稱 :人胰腺癌組織源細胞
產品品牌 :通蔚生物
組織來源 :胰腺癌組織
產品規格 :5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
人胰腺癌組織源細胞分離自患有胰腺癌病人的胰腺癌組織。胰腺癌是一種惡性程度很高,診斷和治療都很困難的消化道惡性腫瘤,約90% 為起源于腺管上皮的導管腺癌。其發病率和死亡率近年來明顯上升。5年生存率< 1% ,是預后最差的惡性腫瘤之一。胰腺癌早期的確診率不高,手術死亡率較高,而治愈率很低。
胰腺癌的病因尚不十分清楚。其發生與吸煙、飲酒、高脂肪和高蛋白飲食、過量飲用咖啡、環境污染及遺傳因素有關。近年來的調查報告發現糖尿病人群中胰腺癌的發病率明顯高于普通人群。也有人注意到慢性胰腺炎病人與胰腺癌的發病存在一定關系,發現慢性胰腺炎病人發生胰腺癌的比例明顯增高。
另外還有許多因素與此病的發生有一定關系,如職業、環境、地理等。隨著醫學技術的進步,大部分癌癥的生存率都在提高,例如乳腺癌,結直腸癌等腫瘤,近幾十年來,生存率得到了大幅度的提升。但胰腺癌的生存率一直停滯不前,缺乏有效的治療方法,極高的死亡率使其成為“癌中之王”,體外培養胰腺癌組織源細胞對研究胰腺癌的治療具有重要意義。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的癌組織源細胞采用膠原酶消化、經離心純化制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的人胰腺癌組織源細胞經檢測,純度可達90% 以上,且不含有H IV-1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :梭形、多角形
傳代特性 :可傳5代左右。3代以內狀態最佳
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
人胰腺癌組織源細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
人胰腺癌組織源細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈梭形、多角形,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳5代左右。3代以內狀態最佳。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。