蘇木素伊紅混合染色液(一步法)
摘要
主要用于細胞涂片染色,尤其適用婦科細胞染色和骨髓細胞染色。
產(chǎn)品介紹
蘇木素伊紅混合染色液(一步法)
產(chǎn)品簡介:
蘇木素
(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色,簡稱HE染色,是病理學常規(guī)制片中基本的染色方法,應用極其廣泛。蘇木 精是從原產(chǎn)中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結晶,是一種堿性染色劑,它在被氧化后生成蘇木素,同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)一起使用,能夠使細胞核染色。在病理診斷、教學和科研工作中,常用HE染色對正常組織和病變組織進行形態(tài)結構觀察。在HE染色的組織切片中,細胞核呈藍色,細胞漿呈紅色,二者形成鮮明的對比,易于觀察分析。
蘇木素伊紅混合染色液是把
蘇木素和伊紅混合在一起,只需對細胞、組織等樣本染色一次,既能使蘇木素上色亦可使伊紅上色的新型染色液
可用于染色樣本的類型有石蠟切片、冰凍切片、血液涂片、培養(yǎng)細胞以及體液涂片
(如宮頸粘液涂片、腦脊液涂片等)等,本產(chǎn)品尤其適用于血液涂片和體液涂片染色。
染色原理:
細胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天 然染料,可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是
DNA,在DNA雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。
細胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學合成的酸性染料,在一 定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的
pH值密切相關。當染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(4.7~5.0)以下時,胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結合,使細胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。
分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在
HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進行伊紅染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。
返藍作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài),呈藍色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現(xiàn)藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍,但所需時間較長。