改良Lillie-Mayer蘇木素染色液
摘要
常規組織切片HE染色
產品介紹
改良Lillie-Mayer蘇木素染色液
產品簡介:
蘇木素
(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯合染色簡稱HE染色,是病理學和組織學很常用的一種染色方法。蘇木 精為堿性天 然染料,可使細胞核著色。細胞核內染色質的主要成分是DNA,在DNA的雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木 精堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。
改良
Lillie-Mayer蘇木素染色液無毒,無氧化膜,細胞核染色質著色深而細微,臨床上常替代Harris蘇木素染色液。對細胞核染色很清晰,不著染胞質和纖維成分,屬進行性染色,故染色后可以不用鹽酸乙醇分化,染色時間約5~8min,如果是充分氧化后可染色3~5min。常用于糖原等特染、酶組化和免疫組化等染色后復染細胞核作對照染色,尤其適用于經過特殊染色后不能經酸處理時對細胞核的復染。在特殊染色中,常與天青石藍B液聯合染色,使細胞核染色后不被后續的酸性染料所褪色。
染色原理:
細胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天 然染料,可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是
DNA,在DNA雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。
細胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學合成的酸性染料,在一 定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質,為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的
pH值密切相關。當染色液pH值在胞漿蛋白質等電點(4.7~5.0)以下時,胞漿蛋白質以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合,使細胞漿著色,呈現紅色。
分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在
HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使組織與色素分離而退色。大多數組織經蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進行伊紅染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。
返藍作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態,呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態,呈藍色。組織切片經酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍,但所需時間較長。