AO染色液(1mg/ml)
摘要
流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞DNA含量,通過染色定量分析DNA,亦可通過熒光顯微鏡觀察形態(tài)變化。
流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞DNA含量,通過染色定量分析DNA,亦可通過熒光顯微鏡觀察形態(tài)變化。AO(Acridine Orange)在低濃度下與DNA結(jié)合較佳,工作濃度8.5ug/ml
產(chǎn)品介紹
AO染色液(1mg/ml)
產(chǎn)品簡介:
Acridine Orange屬于三環(huán)雜芳香燃料,可以標(biāo)記DNA、RNA,屬于異染性熒光染料。
該染料具有膜通透性,能透過細(xì)胞膜,使核
DNA和RNA染色。
因此
AO常用于細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA進(jìn)行檢測。AO與核酸結(jié)合方式主要有:1、插入性結(jié)合,AO嵌入核酸雙鏈的堿基對之間,這種結(jié)合方式主要為AO與DNA的結(jié)合,其熒光發(fā)射峰為530nm,激發(fā)后呈綠色熒光;2、靜電吸引,帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根(帶負(fù)電荷)產(chǎn)生靜電間的吸引結(jié)合,這種結(jié)合方式主要為AO與RNA的結(jié)合,其熒光發(fā)射峰為640nm,激發(fā)后呈紅色熒光,少量結(jié)合會
呈桔黃色或桔紅色熒光
。因此,吖啶橙
嵌合到雙鏈
DNA分子中顯綠色,與DNA單鏈或RNA結(jié)合時(shí)發(fā)桔黃色或橙紅色熒光。
AO染色液(1mg/ml)為儲存液,使用時(shí)應(yīng)稀釋到合適濃度后使用。染色后在熒光顯微鏡下觀察,
AO
可透過正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。
AO
使其染上致密濃染的黃綠色熒光或黃綠色碎片顆粒;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。
AO
染色常與
EB染色合用雙染,因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。